Pengaruh Glukosa Tinggi terhadap Proliferasi, Migrasi dan Ekspresi Gen OCT-4 pada Kultur Sel Dermal Fibroblast Manusia
Authors
-
Restu Syamsul Hadi
-
Yurika Sandra
Keywords:
fibroblast kulit manusia, glukosa tinggi, proliferasi, migrasi, ekspresi gen OCTAbstract
Human dermal fibroblasts (HDF) termasuk sel mesenchymal yang diisolasi dari lapisan dermis kulit. HDF berpotensi digunakan untuk pengobatan penyembuhan luka berdasarkan pengobatan regeneratif. Peningkatan konsentrasi glukosa dapat merusak fungsi sel dan menghambat terapi penyembuhan luka. Penelitian ini dilakukan untuk mengkaji pengaruh glukosa tinggi pada proliferasi, migrasi dan ekspresi gen OCT-4 sel HDF sebagai model penyembuhan luka diabetes in vitro. Pada penelitian eksperimental ini, fibroblast diisolasi dari kulit setelah sirkumsisi, kemudian ditumbuhkan dalam medium Minimal Essential Medium (DMEM) Dulbecco lengkap dengan serum 10%. Untuk menguji efek glukosa tinggi pada proliferasi sel HDF dilakukan dengan uji CCK-8. Migrasi sel HDF dievaluasi menggunakan uji scratch-assay. RT-PCR digunakan untuk menentukan ekspresi gen OCT-4. Hasilnya menunjukkan bahwa glukosa tinggi (25 mM-50 mM) meningkatkan kemampuan proliferasi dan migrasi sel HDF. Efek glukosa tinggi tergantung pada dosis. Perlakuan glukosa pada dosis 75 mM akan menghambat kemampuan pertumbuhan HDF. Ekspresi gen OCT-4 meningkat secara bermakna pada pemberian glukosa dosis 25-50 mM. Hasil penelitian ini memberikan dasar untuk pengembangan terapi dalam kondisi diabetes bahwa terapi sel HDF dapat meningkatkan penyembuhan luka meskipun dalam kondisi glukosa tinggi.References
Baumgartner-Parzer SM, Wagner L, Pettermann M, Grillari J, Gessl A, Waldhausl W. 1995. High-glucose-D triggered apoptosis in cultured endothelial cells. Diabetes. 44(11):1323-7.
Golberg A. et al., 2013. Regeneration and control of human fibroblast cell density by intermittently delivered pulsed electric fields. Biotechnology and Bioengineering. 110(6). pp.1759–1768.
International Diabetes Federation (IDF). 2011. Panduan Global untuk Diabetes Tipe 2 http://communication@idf.org NIH. (2006). Regenerative Medicine. Department of Health and Human Sevices USA.
Metcalfe and Ferguson. 2007. Tissue engineering of replacement skin: the crossroads of biomaterials, wound healing, embryonic development, stem cells and regeneration, J R Soc Interface. Jun 22; 4(14): 413–437.
Patel S, Shikha Srivastava, Manju Rawat Singh, Deependra Singh. 2019. Mechanistic insight into diabetic wounds: Pathogenesis, molecular targets and treatment strategies to pace wound healing, Biomedicine & Pharmacotherapy 112 : 108615.
Racila D, Michael Winter, Mohammed Said, Ann Tomanek-Chalkley, Susan Wiechert, Richard L. Eckert and Jackie R. Bickenbach. 2011. Transient expression of OCT-4 is sufficient to allow human keratinocytes to change their differentiation pathway, Gene Ther. Mar; 18(3): 294–303.
Waspadji S. dkk. 2002. Pedoman Diet Diabetes Mellitus Jakarta: Balai Penerbit Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Halaman 7-8
Willershausen-Zonnchen B, Lemmen C, Hamm G. 1991. Influence of high glucos concentrations on glycosaminoglycan and collagen synthesis in cultured human gingival fibroblasts. J Clin Periodontol; 18(3):190-5.
Yazdanpanah L. Nasiri M and Sara Adarvishi. 2015. Literature review on the management of diabetic foot ulcer. World J Diabetes. Feb 15; 6(1): 37–53.
Zhang W. Yun Zhu, Jia Li. et al., 2016. Cell-Derived Extracellular Matrix: Basic Characteristics and Current Applications in Orthopedic Tissue Engineering Tissue engineering: Part B Volume 22.3.
Zhao J, Li Hu, Jiarong Liu, Niya Gong and Lili Chen. 2013. The Effects of Cytokines in Adipose Stem Cell-Conditioned Medium on the Migration and Proliferation of Skin Fibroblasts In Vitro, Biomed Res Int.: 578479.
