Evaluasi Kemampuan Proliferasi, Diferensiasi dan Viabilitas Sel Punca Asal Pulpa Gigi Manusia Pasca Vitrifikasi

Authors

  • Restu Syamsul Hadi
  • Indra Kusuma

https://doi.org/10.33476/mkp.v11i1.951

Keywords:

dental pulp, diferensiasi, viabilitas, vitrifikasi

Abstract

Sejumlah keterbatasan sumber sel pulpa gigi manusia diantaranya harus dari pulpa gigi sehat dengan jumlah sangat terbatas. Teknologi penyimpanan sel dan pengembangan metode vitrifikasi pada DPSC dan MSC sangat bermanfaat untuk keperluan terapi. Penelitian ini  bertujuan mengkaji pertumbuhan, proliferasi dan diferensiasi serta pengaruh simpan beku metode vitrifikasi terhadap sel punca asal pulpa gigi. Sampel yang digunakan adalah pulpa gigi yang diisolasi. Untuk mengukur proliferasinya digunakan Cell Proliferation Reagent WST-1 Absorbansi diukur menggunakan mikroplate ELISA Zenyth pada panjang gelombang 450 nm. Untuk proses simpan beku dengan metode vitrifikasi sel MSC dipanen dan di-cryopreservasi dengan dua langkah yaitu diberikan dengan Equilibration (EQ) dan vitrifikasi solutions (VS). Untuk diferensiasi sel adipogenik digunakan StemPro Adipogenesis dan diuji dengan pewarnaan Oil Red O. DPSC berhasil diisolasi dan tumbuh dengan baik pada medium alfa MEM dengan serum 10%. Kemampuan proliferasi sel DPSC pada inkubasi 24 jam lebih tinggi secara signifikan dibandingkan inkubasi 18 jam. DPSC dapat terdiferensiasi menjadi neural like cells dan pada sel MSC dengan pemberian differentiation Kit StemPro Adipogenesis, diferensiasi MSC ke arah sel adipogenik setelah pewarnaan menggunakan Oil Red O. Teknik vitrifikasi sebagai metode simpan beku pada MSC menunjukan viabilitas yang tinggi (> 80%) dan sel mampu berproliferasi dan berdiferensiasi dengan baik.

References

Ahmed NE, Aboul-Ezz EH, Zakhary SY.et al., 2011. Isolation of Dental Pulp Stem Cells and their In Vitro Differentiation into Odontoblast-like Cells. Macedon J..Med.Sci. 2011 Sep 30; 4(3):253-260.

Atari M, Barajas M, Hernández-Alfaro F et al. 2011. Isolation of pluripotent stem cells from human third molar dental pulp. Histol Histopathol 26: 1057-1070

Bahadori MH, Soltani B, Mirzajani E, et al. 2009. Cryopreservation of Rat Bone Marrow Derived Mesenchymal, Yakhteh Medical Journal, 11 (3) : 317-326

Desai N, Xu J, Tsulaia T, Szeptycki-Lawson J, Abdelhafez F, Goldfarb J & Falcone T. 2011. Vitrification of mouse embryo-derived ICM cells: a tool for preserving embryonic stem cell potential? J Assist Reprod Genet. 28 (2):93-9

Freshney RI. 2005. Culture of Animal Cells A manual of Basic Technique. WIley, New Jersey.

Gronthos S, Mankani M, Brahim J, Robey PG & Shi S. 2000. Postnatal human dental pulp stem cells (DPSCs) in vitro and in vivo. PNAS 98, 13625-13630.

Halim D, Murti H, Sandra F, Boediono A, Djuwantono T & Setiawan B. 2010. Stem Cell : Dasar Teori dan Aplikasi Klinis. Erlangga.

IDF. 2011. The IDF Diabetes Atlas. International Diabetes Federation.

Isachenko E, Isachenko V, Katkov II, Rahimi G, Schondorf T, Mallmann P, Dessole S & Nawroth F. 2004. DNA integrity and motility of human spermatozoa after standard slow freezing versus cryoprotectant-free vitrification. Human Reproduction 19, 932-939.

IWGDF. 2011. International Consensus on Diabetic Foot. International Working Group on the Diabetic Foot.

Metcalfe A & Ferguson M. 2007. Tissue engineering of replacement skin: The crossroads of biomaterials, wound healing, embryonic development, stem cells and regeneration. Journal of The Royal Society 4, 413-437.

Mitsiadis TA, Feki A, Papaccio G & Caton J. 2011. Dental pulp stem cells, niches, and notch signalling in tooth injury. Adv Dent Res 22.

Mauth AH, Graf-Hausner and Roulet JF. 2007. Restorative Applications for Dental Pulp Therapy. In Tissue Engineering 3:1-32.

Moon JH, Lee JR, Jee BC, Suh CS, Kim SH, Lim HJ & Kim HK. 2008. Succesfull vitrification of human amnion-derived mesenchymal stem cells. Human Reproduction 23, 1760-1770.

Murray PE, Windsor LJ. 2002. Analysis of pulpal reaction to restorative procedures, materials, pulp capping and future therapies. Critical Reviews in Oral Biology & Medicine. 6:508-520.

Niemela S, Miettinen S, Sarkanen JR & N. Ashammakhi. 2008. Adipose tissue and asipocyte differentiation: molecular and celullar aspects and tissue engineering applications. Topics in Tissue Enggineering 4.

NIH. 2006. Regenerative Medicine. Department of Health and Human Sevices USA.

Sakai K, Yamamoto A, Matsubara K., et al. 2012. Human dental pulp-derived stem cells promote locomotor recovery after complete transection of the rat spinal cord by multiple neuro-regenerative mechanisms, J Clin Invest. 122(1):80–90.

Sasaki M, Abe R, Fujita Y, Ando S, Inokuma D & Shimizu H. 2008. Mesenchymal stem cells are recruited into wounded skin and contribute to wound repair by transdifferentiation into multiple skin cell type. The Journal of Immunology 180, 2581-2587.

Sharifi AM, Ghazanfari R, Tekiyehmaroof N & Sharifi MA. 2012. Isolation, cultivation, characterization and expansion of human adipose-derived mesenshymal stem cell for use in regenerative medicine. International Journal of Hematology Oncology and Stem Cell Research 6.

Strom S, Holm F, Bergstrom R, Stromberg A-M & Hovatta O. 2010. Derivation of 30 human embryonic stem cell lines- improving the quality. In Vitro Cell Dev Biol 46, 337-344.

Suyono S. 2002. Patofisiologi Diabetes Melitus. In Penatalaksanaan diabetes melitus terpadu, ed. Soegondo S, Soewondo P & Subekti I, pp. 7. Balai Penerbit FKUI, DKI Jakarta.

UN. 2011. NCDs and MDGs- Succes in Synergy. In 2011 UN High-level meeting on NCDs. United Nations.

Waspadji S. 2002. Diabetes melitus, penyulit kronik dan pencegahannya. In Penatalaksanaan diabetes melitus terpadu, ed. Soegondo S, Soewondo P & Subekti I, pp. 171. Balai Penerbit FKUI, DKI Jakarta.

Yildirim S. 2013. Dental Pulp Stem Cells, SpringerBriefs in Stem Cells,pp 41-51

Downloads

Published

2019-06-01

Issue

Section

Artikel Penelitian